IL-13Rα2 Double Nickase Plasmid (h): sc-402525-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das IL-13Rα2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- IL-13Rα2 Double-Nickase-Plasmid (h) und IL-13Rα2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf IL13RA2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IL-13Rα2: sc-134363
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IL-13Rα2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-402525-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-13Rα2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402525-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane IL13RA2-Gen kodiert IL-13Rα2, eine IL-13-bindende Kette mit hoher Affinität, die die Typ-2-Zytokin-Signalübertragung moduliert und als regulatorische Rezeptorkomponente nachgeschaltete, JAK/STAT6-assoziierte Transkriptionsprogramme beeinflussen kann. Durch die Kontrolle der IL-13-Verfügbarkeit und der Dynamik von Rezeptorkomplexen wirkt IL-13Rα2 auf Antworten von Epithel- und Stromazellen, die mit Entzündung, Gewebeumbau und der Regulation der extrazellulären Matrix verbunden sind. Eine veränderte IL13RA2-Expression wurde in chronisch entzündlichen Mikromilieus sowie in mehreren Tumortypen beschrieben, in denen IL-13-abhängige Signalwege Zellmigration, Invasion und Immuninteraktionen beeinflussen. Diese Eigenschaften machen IL13RA2 zu einem nützlichen Ziel, um in humanen Zellmodellen die Biologie von Zytokinrezeptoren, den Rezeptortransport und durch das Mikromilieu geprägte Signalphänotypen zu untersuchen.
IL-13Rα2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des IL13RA2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von IL13RA2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die IL13RA2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit IL13RA2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.