Plasmide Double Nickase (h) IL-13Rα1: sc-405042-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IL-13Rα1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IL-13Rα1 Double Nickase (h) et le plasmide IL-13Rα1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IL13RA1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IL-13Rα1 Antibody (D-2): sc-398831
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IL-13Rα1 | sc-405042-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IL-13Rα1 | sc-405042-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IL13RA1 code pour le récepteur humain de l’interleukine‑13 alpha 1 (IL‑13Rα1), une sous-unité de récepteur de cytokines de type I qui s’associe à IL4RA pour former un récepteur fonctionnel de l’IL‑13 et contribuer à la signalisation de l’IL‑4. La liaison du ligand active les voies JAK/STAT, en particulier STAT6, déclenchant des programmes transcriptionnels impliqués dans la régulation de la barrière épithéliale, la production de mucus, la polarisation des macrophages et la commutation isotypique des cellules B. La signalisation dépendante d’IL‑13Rα1 est au cœur de l’inflammation de type 2 et est fréquemment étudiée en biologie des voies aériennes et de la peau, notamment dans des modèles d’asthme, d’inflammation allergique et de dermatite atopique. Des altérations de l’expression d’IL13RA1 ou de la dynamique de sa signalisation sont également étudiées dans les interactions immunité–tumeur et dans des contextes de remodelage fibrotique, où les programmes IL‑13–STAT6 peuvent façonner les phénotypes stromaux et myéloïdes.
IL-13Rα1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IL13RA1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IL13RA1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IL13RA1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IL13RA1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.