Plasmide Double Nickase (h) IL-12Rβ2: sc-406442-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IL-12Rβ2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IL-12Rβ2 Double Nickase (h) et le plasmide IL-12Rβ2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IL12RB2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IL-12Rβ2 Antibody (2H6): sc-293379
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IL-12Rβ2 | sc-406442-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IL-12Rβ2 | sc-406442-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **IL12RB2** code la sous-unité β2 du récepteur de l’IL-12, un composant essentiel du complexe récepteur de haute affinité de l’IL-12 avec **IL12RB1**, principalement exprimé sur les lymphocytes T activés et les cellules NK. Lors de la liaison de l’IL-12, IL-12Rβ2 déclenche l’activation de **JAK2/TYK2** et la phosphorylation en aval de **STAT4**, favorisant la polarisation **Th1**, la production d’**IFN-γ** et la mise en place de programmes effecteurs cytotoxiques. Cet axe de signalisation s’intègre aux réseaux de cytokines inflammatoires pour façonner l’immunité à médiation cellulaire et l’immunosurveillance. Une expression ou une signalisation dérégulée d’**IL12RB2** a été associée à une réactivité immunitaire altérée dans les infections, l’auto-immunité et l’échappement immunitaire associé aux tumeurs, ce qui en fait une cible utile pour des études mécanistiques de la différenciation et de la fonction induites par les cytokines.
IL-12Rβ2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IL12RB2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IL12RB2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IL12RB2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IL12RB2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.