IL-11Rα CRISPR Activation Plasmid (h): sc-402503-ACT
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- IL-11Rα CRISPR Activation Plasmid (h) ist ein Transkriptionsaktivierungs System (SAM) welches für die gezielte Verstärkung der Genexpression bestimmt ist
- IL-11Rα CRISPR Aktivierungsplasmide (h) bestehen aus 3 Plasmiden im Massenverhältnis 1:1:1: ein Plasmid kodiert für die deaktivierte Cas9 (dCas9) Nuklease (D10A und N863A) fusioniert an die Transaktivierungsdomaine VP64 sowie ein Gen für die Blasticidin Resistenz; ein zweites Plasmid kodierend für das MS2-p65-HSF1 Fusionsprotein sowie ein Gen für die Hygromycin Resistenz; ein drittes Plasmid kodierd für die Ziel-spezifische 20 nt guide RNA fusioniert an zwei MS2 RNA Aptamere sowie ein Gen für die Puromycin Resistenz.
- Der entstehende SAM-Komplex (Mediator-Komplex zur synergistischen Gen-Aktivierung) bindet eine sequenzspezifische Region 200-250 nt upstream (in 5'-Richtung) des Transkriptionsstartsignals und rekrutiert dort ständig Transkriptionsfaktoren für eine verstärkte Gen-Aktivierung und Gen-Expression.
- Die vom IL-11Rα CRISPR-Aktivierungsplasmid (h) und vom IL-11Rα CRISPR-Aktivierungsplasmid (h2) kodierten gRNAs zielen auf unterschiedliche regulatorische Regionen stromaufwärts der IL11RA-Transkriptionsstartstelle ab. Eines oder beide Designs sind möglicherweise verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IL-11Rα: sc-130920
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IL-11Rα CRISPR Activation Plasmid (h) | sc-402503-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
IL-11Rα CRISPR Activation Plasmid (h2) | sc-402503-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
IL11RA kodiert den humanen Interleukin‑11‑Rezeptor alpha (IL‑11Rα), die ligandenbindende Untereinheit, die mit dem gp130‑Korezeptor zusammenwirkt, um als Antwort auf IL‑11 eine Signalübertragung zu initiieren. Die Rezeptorbindung aktiviert die JAK/STAT‑Signalgebung, wobei auch MAPK/ERK‑ und PI3K/AKT‑Signalwege beitragen und so Transkriptionsprogramme formen, die das Überleben, die Proliferation und die Differenzierung von Zellen in verschiedenen stromalen und epithelialen Kontexten regulieren. Die IL‑11Rα‑abhängige Signalgebung wird häufig im Zusammenhang mit fibroinflammatorischen Prozessen, Umbau der extrazellulären Matrix und Gewebehomöostase untersucht; eine veränderte Aktivität dieses Signalwegs wurde mit der Krankheitsbiologie von Fibrose‑ und Entzündungserkrankungen in Verbindung gebracht. Als Oberflächenrezeptor mit definierter upstream‑Ligandensteuerung und nachgeschalteten transkriptionellen Outputs ist IL11RA ein nützlicher Knotenpunkt, um Zytokin‑Signaldynamiken und Pathway‑Crosstalk in humanen Zellmodellen zu analysieren.
IL-11Rα Das CRISPR-Aktivierungsplasmid (h) bietet einen gezielten, nicht-destruktiven Ansatz zur Hochregulierung der endogenen IL11RA-Expression, ohne die zugrunde liegende DNA-Sequenz zu verändern.
IL-11Rα Das CRISPR-Aktivierungsplasmid (h) ist ein aus drei Plasmiden bestehendes synergistisches Aktivierungsmediator-System (SAM), das für eine hocheffiziente, ortsspezifische transkriptionelle Hochregulation des IL11RA-Lokus in menschlichen Zelllinien entwickelt wurde. Das System basiert auf einem katalytisch inaktiven Cas9 (dCas9), das zwei inaktivierende Mutationen (D10A und N863A) trägt, welche die Nukleaseaktivität eliminieren, während die DNA-Bindung erhalten bleibt. Dieses dCas9 ist mit VP64, einem potenten Transkriptionsaktivator, fusioniert und wird zusammen mit einem Blasticidin-Resistenzgen zur Selektion koexprimiert. Das zweite Plasmid kodiert das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein, einen sekundären Aktivatorkomplex, der zusammen mit dCas9-VP64 wirkt, sowie ein Hygromycin-Resistenzgen. Das dritte Plasmid kodiert für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA, die an zwei MS2-RNA-Aptamere fusioniert ist, welche den MS2-p65-HSF1-Komplex an die Aktivierungsstelle rekrutieren, begleitet von einem Puromycin-Resistenzgen. Die drei Plasmide werden im Massenverhältnis 1:1:1 verabreicht, um eine ausgewogene Expression aller Systemkomponenten zu gewährleisten.
Nach der Assemblierung am Zielort bindet der SAM-Komplex etwa 200 bp stromaufwärts der IL11RA-Transkriptionsstartstelle, wo VP64, p65 und HSF1 gemeinsam die Transkriptionsmaschinerie rekrutieren und die Hochregulation der endogenen IL-11Rα-Expression vorantreiben. Im Gegensatz zu nukleaseaktivem Cas9 verursacht dCas9 keine Doppelstrangbrüche und verändert die genomische Sequenz nicht, wodurch der native IL11RA-Locus erhalten bleibt und die Untersuchung von IL-11Rα-abhängigen Transkriptionsreaktionen am endogenen Locus ermöglicht wird. Dies macht es zu einem wertvollen Werkzeug für Funktionsstudien, die Identifizierung von Zielgenen und die Modellierung der Wiederherstellung des IL-11Rα-Signalwegs in Tumorzellen mit stillgelegtem oder reduziertem IL11RA-Ausdruck.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.