Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IL-10Rβ Double Nickase Plasmid (h): sc-404666-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das IL-10Rβ Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- IL-10Rβ Double-Nickase-Plasmid (h) und IL-10Rβ Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf IL10RB abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IL-10Rβ: sc-271969
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IL-10Rβ Double Nickase Plasmid (h) | sc-404666-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-10Rβ Double Nickase Plasmid (h2) | sc-404666-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IL10RB kodiert die Beta-Untereinheit des Interleukin-10-Rezeptors (IL‑10Rβ), eine essentielle akzessorische Kette, die von mehreren Zytokinrezeptoren der Klasse II gemeinsam genutzt wird, darunter die Rezeptoren für IL‑10, IL‑22, IL‑26 und Typ‑III‑Interferone (IFN‑λ). Nach Ligandenbindung bildet IL‑10Rβ zusammen mit der jeweiligen ligandspezifischen Alpha-Untereinheit einen Rezeptorkomplex, der die Aktivierung von JAK1/TYK2 und nachgeschaltete STAT-Signalwege unterstützt. Dadurch werden Transkriptionsprogramme geprägt, die Entzündung, die Funktion der epithelialen Barriere und antivirale Antworten regulieren. Diese Rezeptoruntereinheit ist somit zentral für die zytokinvermittelte Immunhomöostase an mukosalen Oberflächen sowie in myeloiden und lymphoiden Kompartimenten. Störungen der IL10RB-abhängigen Signalübertragung werden häufig im Kontext fehlregulierter Zytokinantworten untersucht, die für Infektionsbiologie, entzündliche Pathologie und immunvermittelte Mechanismen relevant sind.
IL-10Rβ Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des IL10RB-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von IL10RB abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die IL10RB-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit IL10RB-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.