IGF2BP2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-435664

Descripción general

Igf2bp2 codifica IGF2BP2, una proteína de unión a ARN que reconoce transcritos modificados con N6‑metiladenosina (m6A) y modula la estabilidad, la localización y la traducción del ARNm. Mediante el control postranscripcional de la expresión génica, IGF2BP2 influye en redes de señalización metabólica, incluidas las vías de insulina/IGF y PI3K–AKT, afectando así al crecimiento celular, la homeostasis energética y las respuestas al estrés. En modelos murinos y en genética humana, la actividad alterada de IGF2BP2 se ha vinculado a fenotipos metabólicos como la resistencia a la insulina y la susceptibilidad a la diabetes tipo 2, y también se ha descrito una expresión desregulada en contextos proliferativos e inflamatorios. Estas características hacen de IGF2BP2 un nodo útil para estudiar decisiones sobre el destino del ARN y la regulación dependiente de m6A en estados celulares metabólicos y relevantes para la enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO IGF2BP2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Igf2bp2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Igf2bp2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Igf2bp2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IGF2BP2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Igf2bp2 para la investigación de la señalización de IGF2BP2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Igf2bp2 críticos para la función de IGF2BP2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Igf2bp2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido IGF2BP2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IGF2BP2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Igf2bp2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IGF2BP2 (m) y el plásmido HDR IGF2BP2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Igf2bp2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Igf2bp2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.