Plasmide CRISPR/Cas9 KO IFN-ω (h): sc-409162
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- IFN-omega Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique IFN-omega, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IFN-ω Antibody (1PL11): sc-71318
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO IFN-ω (h) | sc-409162 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
IFNW1 code l’interféron oméga (IFN-ω), une cytokine d’interféron de type I qui contribue à la défense antivirale innée et à la régulation immunitaire. Après engagement du complexe récepteur IFNAR, l’IFN-ω active une signalisation dépendante de JAK1/TYK2, induisant une transcription des gènes stimulés par les interférons (ISG) pilotée par STAT1/STAT2/IRF9, ce qui module la restriction antivirale, la présentation de l’antigène et le niveau d’inflammation. Cette voie s’entrecroise avec les programmes IRF et NF-κB afin de coordonner les réponses de détection des pathogènes et le dialogue avec l’immunité adaptative. Une signalisation des interférons de type I dérégulée est impliquée dans la susceptibilité virale, l’inflammation chronique et des phénotypes auto-immuns associés aux interférons, ce qui fait d’IFNW1 un point d’entrée utile pour disséquer la biologie des interférons.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO IFN-omega (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène IFNW1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du IFNW1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert IFNW1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine IFN-omega.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en IFNW1 pour l'étude de la signalisation de IFN-omega, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de IFNW1 essentiels à la fonction de IFN-omega
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de IFNW1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le IFN-omega plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le IFN-omega plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus IFNW1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le IFN-omega plasmide HDR (h) et le IFN-omega (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie IFNW1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles IFNW1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.