Partículas Lentivirales de Activación (h) IFN-γRα: sc-401191-LAC

IFNGR1 codifica la cadena alfa del receptor humano de interferón-γ (IFN-γRα), la subunidad de unión al ligando que se asocia con IFNGR2 para formar el complejo receptor funcional del interferón-γ. Tras la unión de la citocina, JAK1 y JAK2 asociadas al receptor activan STAT1, lo que promueve la transcripción de genes estimulados por interferón que regulan la presentación de antígenos, la activación de macrófagos y programas efectores antimicrobianos. La señalización de IFN-γRα moldea la inmunidad de tipo Th1 y la inmunovigilancia mediante la interacción con NF-κB y las vías de procesamiento de antígenos, influyendo en las respuestas celulares frente a patógenos intracelulares y señales inflamatorias. La desregulación o el deterioro de la función de IFNGR1 se asocia con susceptibilidad a infecciones por micobacterias, respuestas inflamatorias alteradas y fenotipos de evasión inmunitaria relevantes para modelos de investigación en cáncer e infecciones crónicas.

Las partículas de activación lentiviral IFN-γRα (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de IFNGR1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral IFN-γRα (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción IFNGR1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de IFN-γRα. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo IFNGR1 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.