Plásmido Doble Nickase (m) IFI-44: sc-430287-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)IFI-44 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IFI-44 (m) y el plásmido de doble nickasa IFI-44 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Ifi44. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) IFI-44 | sc-430287-NIC | 20 µg | $410.00 |
La proteína 44 inducida por interferón (IFI-44), codificada por el gen Ifi44 del ratón, es un producto de un gen estimulado por interferón que se induce aguas abajo de la señalización del interferón de tipo I y de la activación de receptores de reconocimiento de patrones durante las respuestas antivirales e inflamatorias. La expresión de IFI-44 se utiliza comúnmente como marcador de activación de la inmunidad innata y se asocia con la regulación de programas celulares como redes de transcripción impulsadas por interferón y mecanismos de restricción del hospedador. La desregulación de IFI-44 y de firmas relacionadas de genes estimulados por interferón se observa en contextos infecciosos y mediados por el sistema inmune, lo que respalda su utilidad para estudiar la biología de las vías del interferón, los estados de activación de células inmunitarias y fenotipos moleculares asociados a la inflamación. En sistemas de modelos murinos, la perturbación de Ifi44 ayuda a desentrañar mecanismos de respuesta al interferón y funciones efectoras posteriores en distintos tejidos.
IFI-44 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Ifi44 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Ifi44. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Ifi44. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Ifi44 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.