IFI-204 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421033

Descripción general

El gen murino Ifi204 codifica IFI-204, un miembro inducible por interferón de la familia de proteínas PYHIN, implicado en la vigilancia inmunitaria innata y en la regulación de la expresión génica inflamatoria. IFI-204 se asocia con programas de detección de ácidos nucleicos tanto nucleares como citosólicos que convergen en la señalización de interferón tipo I, en respuestas transcripcionales vinculadas a NF-κB y en puntos de control del ciclo celular. A través de estas vías, Ifi204 se ha estudiado en contextos de restricción antiviral, activación de macrófagos y células dendríticas, y modulación de estados proliferativos frente a senescentes. Por tanto, la actividad desregulada de IFI-204 es relevante para modelos experimentales de inflamación crónica, fenotipos similares a autoinmunidad, patología impulsada por infecciones e interacciones tumor-inmunidad, sin que ello implique un desenlace clínico.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO IFI-204 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ifi204 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ifi204 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ifi204 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IFI-204.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ifi204 para la investigación de la señalización de IFI-204, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Ifi204 críticos para la función de IFI-204
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ifi204 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido IFI-204 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IFI-204 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ifi204. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IFI-204 (m) y el plásmido HDR IFI-204 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ifi204 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ifi204 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.