IFI-203 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-421032

Panoramica

Ifi203 codifica IFI-203, una proteina murina inducibile dall’interferone implicata nella sorveglianza immunitaria innata e nella regolazione dei programmi genici infiammatori. IFI-203 è comunemente studiata nel contesto delle risposte stimolate dall’interferone, in cui può influenzare il rilevamento degli acidi nucleici, il controllo trascrizionale e la segnalazione citochinica a valle. Una regolazione alterata delle vie dell’interferone è rilevante in modelli di autoimmunità, infiammazione cronica e interazioni ospite–patogeno, rendendo Ifi203 un locus utile per analizzare i circuiti immunitari cellulo-intrinseci. Perturbazioni di Ifi203 con perdita o acquisizione di funzione possono aiutare a definire come i programmi guidati dall’interferone modellino gli stati di attivazione delle cellule immunitarie e i fenotipi infiammatori tissutali nel topo.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO IFI-203 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Ifi203 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Ifi203 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Ifi203 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina IFI-203.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Ifi203 per lo studio della segnalazione di IFI-203, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Ifi203 critici per la funzione di IFI-203
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Ifi203 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal IFI-203 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal IFI-203 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Ifi203. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal IFI-203 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR IFI-203 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Ifi203 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Ifi203 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.