Plásmido Doble Nickase (h) Id2: sc-400550-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Id2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Id2 (h) y el plásmido de doble nickasa Id2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ID2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Id2 Anticuerpo (E-7): sc-398104
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Id2 | sc-400550-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Id2 | sc-400550-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El ID2 humano (inhibidor de la unión al ADN 2) codifica una proteína hélice–bucle–hélice que carece de un dominio de unión al ADN y actúa como regulador dominante negativo de las proteínas E para modular programas transcripcionales que controlan la proliferación, el compromiso de linaje y la diferenciación. ID2 integra señales de vías del desarrollo y asociadas al estrés, incluidas las redes de TGF-β/BMP y relacionadas con Notch, influyendo en el control del ciclo celular y en las decisiones de destino celular en contextos inmunitarios, neuronales y epiteliales. La expresión y actividad desreguladas de ID2 se han asociado con estados de diferenciación alterados y fenotipos de crecimiento aberrantes, lo que lo convierte en un nodo útil para estudiar mecanismos de plasticidad celular y biología tumoral. ID2 también es relevante para la investigación del desarrollo y la función de las células inmunitarias, donde ayuda a configurar los circuitos transcripcionales subyacentes a la especificación linfoide y mieloide.
Id2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ID2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ID2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ID2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ID2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.