Plasmide Double Nickase (h) ICAM-2: sc-403029-NIC

ICAM2 code la molécule d’adhérence intercellulaire 2 (ICAM‑2), une glycoprotéine de surface appartenant à la superfamille des immunoglobulines, exprimée principalement par les cellules endothéliales et les leucocytes. ICAM‑2 agit comme ligand d’adhérence pour les intégrines β2, telles que LFA‑1 (ITGAL/ITGB2), en favorisant l’accrochage des leucocytes, leur adhérence ferme et leur migration transendothéliale lors de la surveillance immunitaire et de l’inflammation. Par ces interactions, elle contribue à la régulation de la dynamique du cytosquelette, de la polarité cellulaire et de l’organisation des jonctions dans les contextes vasculaire et immunitaire. Une signalisation d’adhérence dérégulée impliquant des membres de la famille ICAM est associée aux lésions tissulaires inflammatoires, aux dysfonctionnements vasculaires et aux interactions tumeur–système immunitaire, ce qui fait d’ICAM2 un point d’entrée utile pour des études mécanistiques sur le trafic des cellules immunitaires et la biologie endothéliale.

ICAM-2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ICAM2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ICAM2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ICAM2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ICAM2.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.