I830077J02Rik Double Nickase Plasmid (m): sc-436641-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das I830077J02Rik Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- I830077J02Rik Double-Nickase-Plasmid (m) und I830077J02Rik Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf I830077J02Rik abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
I830077J02Rik Double Nickase Plasmid (m) | sc-436641-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
I830077J02Rik Double Nickase Plasmid (m2) | sc-436641-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das Mausgen **I830077J02Rik** kodiert ein nur unzureichend charakterisiertes Protein mit begrenzter funktioneller Annotation und wird häufig als potenzieller Regulator betrachtet, der in transkriptomischen und vergleichend-genomischen Studien identifiziert wurde. Die verfügbare Evidenz deutet darauf hin, dass seine biologische Rolle kontextabhängig sein könnte, mit möglichen Bezügen zu grundlegenden zellulären Prozessen wie Transkriptionskontrolle, RNA-Stoffwechsel oder Proteinhomöostase, die Zellzustandsübergänge beeinflussen. Daher ist **I830077J02Rik** von Interesse, um Gen-Netzwerke zu entschlüsseln, die Entwicklung, Gewebehomöostase und Stressantworten prägen. Veränderte Expression uncharakterisierter Loci wie **I830077J02Rik** wird häufig in krankheitsassoziierten Expressionssignaturen beobachtet, was mechanistische Studien motiviert, die in relevanten Mausmodellen den Zusammenhang zwischen Genotyp und Phänotyp herstellen.
I830077J02Rik Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des I830077J02Rik-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von I830077J02Rik abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die I830077J02Rik-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit I830077J02Rik-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.