Plásmido Doble Nickase (h) I1PP2A: sc-402988-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ANP32A consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ANP32A (h) y el plásmido de doble nickasa ANP32A (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ANP32A. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ANP32A Anticuerpo (A-182): sc-100767
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) I1PP2A | sc-402988-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ANP32A | sc-402988-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANP32A codifica I1PP2A, una fosfoproteína nuclear ácida rica en leucina que actúa como inhibidor de la fosfatasa de proteínas 2A (PP2A) y como regulador de procesos asociados a la cromatina. Al modular eventos de desfosforilación dependientes de PP2A, I1PP2A influye en la progresión del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y los nodos de señalización que integran el control transcripcional con la adaptación celular al estrés. ANP32A también participa en el metabolismo del ARNm y en la dinámica nucleocitoplasmática mediante interacciones con factores de unión a ARN y de remodelación de la cromatina. La actividad desregulada de ANP32A/I1PP2A se ha vinculado en la literatura con fenotipos de proliferación y supervivencia alterados, lo que respalda su relevancia para estudios de señalización oncogénica y de vías neurodegenerativas.
ANP32A El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ANP32A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ANP32A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ANP32A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ANP32A alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.