Plásmido Doble Nickase (h) HXK II: sc-400611-NIC

El gen humano **HK2** codifica la **hexoquinasa II (HXK II)**, una enzima asociada a la mitocondria que cataliza la fosforilación de la glucosa a **glucosa-6-fosfato** dependiente de ATP, comprometiendo la glucosa con la **glucólisis** y la **vía de las pentosas fosfato**. Al acoplarse a los **canales aniónicos dependientes de voltaje** en la membrana mitocondrial externa, la HXK II ayuda a coordinar la **bioenergética celular**, la **homeostasis redox** y el **flujo metabólico** bajo condiciones cambiantes de nutrientes y oxígeno. HK2 se estudia con frecuencia en el contexto de la **reprogramación metabólica**, donde un control glucolítico alterado influye en la proliferación, las respuestas al estrés y la adaptación a la hipoxia. La actividad y la expresión desreguladas de HK2/HXK II se han implicado en múltiples modelos relevantes para enfermedades, incluido el metabolismo del cáncer y estados de resistencia a la insulina, lo que la convierte en una diana habitual para estudios mecanísticos del manejo de la glucosa.

HXK II El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HK2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HK2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HK2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HK2 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.