Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) HtrA2: sc-402576-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)HtrA2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HtrA2 (h) y el plásmido de doble nickasa HtrA2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HTRA2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HtrA2 Anticuerpo (E-3): sc-365594
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) HtrA2 | sc-402576-NIC | 20 µg | $410.00 |
HTRA2 codifica HtrA2 (también conocida como Omi), una proteasa mitocondrial de serina que contribuye al control de calidad de las proteínas y a la homeostasis mitocondrial. Tras el estrés celular, HtrA2 puede liberarse al citosol, donde modula la apoptosis al antagonizar las proteínas inhibidoras de la apoptosis (IAP) e influir en la activación de las caspasas. Esta proteína también se ha vinculado con la dinámica mitocondrial, las respuestas al estrés por proteínas mal plegadas y las vías de proteostasis que determinan las decisiones de supervivencia celular. La actividad o expresión desregulada de HTRA2 se ha asociado con la neurodegeneración y con otras afecciones caracterizadas por disfunción mitocondrial y señalización apoptótica alterada.
HtrA2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HTRA2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HTRA2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HTRA2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HTRA2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.