Plásmido Doble Nickase (h) HSPA6: sc-400870-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)HSPA6 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HSPA6 (h) y el plásmido de doble nickasa HSPA6 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HSPA6. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HSPA6 Anticuerpo (G-9): sc-374589
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) HSPA6 | sc-400870-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) HSPA6 | sc-400870-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSPA6 codifica un miembro inducible por estrés de la familia de chaperonas HSP70, que estabiliza proteínas nacientes y dañadas y ayuda a restablecer la proteostasis tras un estrés celular agudo. HSPA6 participa en el plegamiento de proteínas dependiente de ATP, en la prevención de la agregación proteica y en la recuperación del proteoma después de choque térmico, estrés oxidativo y agresiones proteotóxicas, interactuando con vías como la respuesta al choque térmico, el manejo de proteínas mal plegadas y el control de calidad proteico. Al influir en la capacidad de plegamiento y en la disponibilidad de chaperonas, la expresión de HSPA6 puede modular la susceptibilidad celular a la disfunción inducida por estrés, lo que la hace relevante para estudios del desequilibrio de la proteostasis observado en la neurodegeneración, la adaptación al estrés en células cancerosas y los microambientes inflamatorios.
HSPA6 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HSPA6 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HSPA6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HSPA6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HSPA6 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.