Plásmido Doble Nickase (h) HSPA2: sc-400832-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)HSPA2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HSPA2 (h) y el plásmido de doble nickasa HSPA2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HSPA2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) HSPA2 | sc-400832-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) HSPA2 | sc-400832-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSPA2 codifica una chaperona molecular citosólica de la familia HSP70 que favorece el plegamiento de proteínas dependiente de ATP, el replegamiento de sustratos desnaturalizados por estrés y el control de calidad mediante interacciones con co-chaperonas y componentes del sistema ubiquitina–proteasoma. En células humanas, HSPA2 contribuye a la proteostasis en condiciones basales y de estrés, influyendo en vías vinculadas a la respuesta a choque térmico, la progresión del ciclo celular y el mantenimiento del ensamblaje de complejos proteicos. La expresión y la alteración funcional de HSPA2 se han estudiado en contextos que incluyen la biología de células germinales y la proteostasis en células tumorales, donde una actividad de chaperona modificada puede afectar la señalización de supervivencia y la adaptación al estrés. Como regulador nodal de la integridad del proteoma, HSPA2 es un objetivo útil para estudios mecanísticos del estrés de plegamiento, el control de la agregación y la reorganización de redes de chaperonas.
HSPA2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HSPA2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HSPA2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HSPA2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HSPA2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.