Plásmido Doble Nickase (h) HSPA1L: sc-400479-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)HSPA1L consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HSPA1L (h) y el plásmido de doble nickasa HSPA1L (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HSPA1L. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HSPA1L Anticuerpo (C-6): sc-393297
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) HSPA1L | sc-400479-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) HSPA1L | sc-400479-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSPA1L codifica un miembro inducible por estrés de la familia de chaperonas HSP70 que mantiene la homeostasis proteica al unirse a polipéptidos desplegados y coordinar su replegamiento, su tráfico o su derivación para degradación. HSPA1L participa en redes celulares de proteostasis que incluyen la señalización de la respuesta al choque térmico, ciclos de ATPasa regulados por cochaperonas y la interacción con las vías de ubiquitina–proteasoma y de autofagia durante el estrés proteotóxico. Al modular la capacidad de plegamiento proteico y la resiliencia al estrés, HSPA1L es relevante en contextos en los que el equilibrio de chaperonas influye en la supervivencia celular, la diferenciación y la biología inmunitaria o reproductiva. La actividad de chaperonas desregulada se ha asociado con una tolerancia al estrés alterada y con el control de calidad proteico vinculado a enfermedades, lo que convierte a HSPA1L en una diana útil para estudios mecanísticos de la proteostasis.
HSPA1L El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HSPA1L en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HSPA1L. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HSPA1L. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HSPA1L alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.