HSPA1L Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400479-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HSPA1LO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HSPA1L (h) e o Plasmídeo Double Nickase HSPA1L (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HSPA1L. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HSPA1L Anticorpo (C-6): sc-393297
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HSPA1L Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400479-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HSPA1L Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400479-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSPA1L codifica um membro induzível por estresse da família de chaperonas HSP70, que sustenta a homeostase proteica ao se ligar a polipeptídeos desnaturados e coordenar seu redobramento, tráfego ou direcionamento para degradação. A HSPA1L participa de redes celulares de proteostase, incluindo a sinalização da resposta ao choque térmico, ciclos de ATPase regulados por co-chaperonas e a comunicação com as vias ubiquitina–proteassoma e de autofagia durante estresse proteotóxico. Ao modular a capacidade de dobramento de proteínas e a resiliência ao estresse, a HSPA1L é relevante em contextos nos quais o equilíbrio de chaperonas influencia a sobrevivência celular, a diferenciação e a biologia imune ou reprodutiva. A atividade desregulada de chaperonas tem sido associada a alterações na tolerância ao estresse e ao controle de qualidade proteica ligado a doenças, tornando a HSPA1L um alvo útil para estudos mecanísticos de proteostase.
HSPA1L O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HSPA1L em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HSPA1L. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HSPA1L. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HSPA1L interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.