Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HSPA14 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407280
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- HSPA14 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico HSPA14, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HSPA14 Anticuerpo (G-9): sc-398208
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
HSPA14 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407280 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
HSPA14 (proteína similar a Hsp70 1) es un miembro de la familia de chaperonas HSP70 que contribuye al control de calidad de las proteínas al estabilizar polipéptidos nacientes, promover el plegamiento correcto y limitar la agregación durante el estrés celular. Participa en redes de proteostasis vinculadas a la traducción, al acompañamiento de chaperonas asociado al ribosoma y a vías sensibles al estrés que coordinan la recuperación tras el choque térmico y otras agresiones proteotóxicas. Al modular el equilibrio entre la capacidad de plegamiento y el manejo de proteínas mal plegadas, HSPA14 ayuda a configurar la homeostasis celular en contextos como el estrés oxidativo, la comunicación cruzada de proteostasis entre el RE y el citosol, y la señalización adaptativa al estrés. La actividad desregulada de chaperonas y el desequilibrio de la proteostasis se estudian con frecuencia en biología del cáncer, neurodegeneración y modelos de estrés inflamatorio, lo que convierte a HSPA14 en un objetivo útil para investigaciones mecanísticas sobre la resiliencia al estrés y la homeostasis proteica.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO HSPA14 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen HSPA14 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del HSPA14 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de HSPA14 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HSPA14.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en HSPA14 para la investigación de la señalización de HSPA14, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de HSPA14 críticos para la función de HSPA14
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de HSPA14 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido HSPA14 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido HSPA14 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus HSPA14. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HSPA14 (h) y el plásmido HDR HSPA14 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología HSPA14 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana HSPA14 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.