Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) HSP 90α: sc-420981-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)HSP 90α consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HSP 90α (m) y el plásmido de doble nickasa HSP 90α (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Hsp90aa1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HSP 90α Anticuerpo (F-2): sc-515081
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) HSP 90α | sc-420981-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) HSP 90α | sc-420981-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen murino **Hsp90aa1** codifica la chaperona citosólica inducible **HSP 90α**, un componente central de la red de proteostasis que estabiliza y facilita la maduración de una amplia variedad de proteínas cliente, incluidas quinasas, receptores de esteroides y factores de transcripción. HSP 90α coopera con cochaperonas como **CDC37** y la maquinaria de **HSP70** para regular el plegamiento proteico, el control de calidad y la remodelación, dependiente del estrés, de complejos de señalización. A través de estas interacciones, influye en vías como **MAPK/ERK**, **PI3K–AKT** y la señalización por hormonas esteroideas, afectando la progresión del ciclo celular, la apoptosis y las respuestas al estrés proteotóxico. La desregulación del chaperonaje dependiente de HSP90α se ha vinculado con cambios en la robustez de la señalización y en la homeostasis proteica en modelos de biología del cáncer, neurodegeneración y estrés inflamatorio.
HSP 90α El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Hsp90aa1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Hsp90aa1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Hsp90aa1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Hsp90aa1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.