Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) HSP 56: sc-403455-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)HSP 56 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HSP 56 (h) y el plásmido de doble nickasa HSP 56 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a FKBP4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HSP 56 Anticuerpo (329.1): sc-100758
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) HSP 56 | sc-403455-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) HSP 56 | sc-403455-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FKBP4 codifica la inmunofilina FKBP52 (HSP56), una cocochaperona con dominio TPR que se asocia a complejos de HSP90 para regular el plegamiento, la estabilidad y el tráfico de proteínas cliente. Es conocida sobre todo por modular la maduración y la translocación nuclear de los receptores de hormonas esteroideas, vinculando la actividad de chaperonas con las vías de señalización de los receptores de andrógenos, glucocorticoides y progesterona. FKBP4 también interactúa con la maquinaria de transporte del citoesqueleto y puede influir en las respuestas celulares al estrés a través de redes de proteostasis. La disfunción desregulada de la cocochaperona FKBP4/HSP90 se ha implicado en alteraciones de la señalización hormonal y de la homeostasis proteica observadas en contextos de investigación en biología del cáncer y neurodegeneración.
HSP 56 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FKBP4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FKBP4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FKBP4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FKBP4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.