Plásmido Doble Nickase (h) HSBP1: sc-416835-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)HSBP1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HSBP1 (h) y el plásmido de doble nickasa HSBP1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HSBP1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HSBP1 Anticuerpo (2C3): sc-517153
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) HSBP1 | sc-416835-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) HSBP1 | sc-416835-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La HSBP1 humana (proteína 1 de unión al factor de choque térmico) es una pequeña proteína reguladora de tipo coiled-coil que se une al factor de choque térmico 1 (HSF1) y modula la respuesta al choque térmico al atenuar la trimerización de HSF1 y su actividad transcripcional. Mediante este control por retroalimentación, HSBP1 ayuda a configurar programas de proteostasis que involucran chaperonas moleculares y la expresión génica inducida por el estrés, influyendo en la tolerancia celular al estrés térmico, oxidativo y proteotóxico. La regulación vinculada a HSBP1 se intersecta con vías que gobiernan el control de calidad de las proteínas, la progresión del ciclo celular y la señalización adaptativa al estrés. La señalización de choque térmico desregulada y las redes de chaperonas se implican con frecuencia en la biología del cáncer, la neurodegeneración y otros trastornos caracterizados por el mal plegamiento proteico, lo que convierte a HSBP1 en un nodo útil para estudios mecanísticos de los circuitos de respuesta al estrés.
HSBP1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HSBP1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HSBP1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HSBP1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HSBP1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.