Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HS6ST1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405111
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- HS6ST1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico HS6ST1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HS6ST1 Anticuerpo (C-9): sc-398231
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
HS6ST1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405111 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
HS6ST1 codifica la heparán sulfato 6-O-sulfotransferasa 1, una enzima residente del aparato de Golgi que cataliza la 6-O-sulfatación de residuos de glucosamina durante la maduración de los proteoglicanos de heparán sulfato. Esta modificación configura sitios de unión del heparán sulfato que controlan la distribución y la potencia de señalización de múltiples morfógenos y factores de crecimiento, influyendo en procesos como la señalización de receptores tirosina quinasa, las interacciones célula–matriz y el patrón del desarrollo. Al ajustar la microestructura del heparán sulfato, HS6ST1 puede modular de manera dependiente del contexto vías como la señalización de FGF, WNT, BMP y Hedgehog. Los programas alterados de sulfatación del heparán sulfato en los que participa HS6ST1 se han asociado con comunicación celular desregulada en biología del cáncer y con fenotipos del neurodesarrollo, lo que lo convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos de la regulación de la señalización extracelular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO HS6ST1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen HS6ST1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del HS6ST1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de HS6ST1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HS6ST1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en HS6ST1 para la investigación de la señalización de HS6ST1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de HS6ST1 críticos para la función de HS6ST1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de HS6ST1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido HS6ST1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido HS6ST1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus HS6ST1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HS6ST1 (h) y el plásmido HDR HS6ST1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología HS6ST1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana HS6ST1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.