Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO HP1β (h): sc-403235
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- HP1β Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique HP1β, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HP1β Antibody (4D7B8): sc-517288
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO HP1β (h) | sc-403235 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CBX1 code pour la protéine 1 de l’hétérochromatine bêta (HP1β), un adaptateur de chromatine conservé qui reconnaît H3K9me2/3 via son chromodomaine et contribue à la compaction de la chromatine grâce à des interactions avec les méthyltransférases d’histones SUV39H et d’autres répresseurs. HP1β participe à la formation de l’hétérochromatine, au silençage transcriptionnel, au contrôle du timing de réplication de l’ADN et au maintien de la stabilité du génome en coordonnant l’architecture de la chromatine à un niveau supérieur. Elle intervient également dans les réponses aux dommages de l’ADN et le choix des voies de réparation en modulant l’accessibilité au niveau des loci endommagés et en influençant le recrutement des facteurs de réparation. La dérégulation des programmes épigénétiques liés à HP1β a été associée à des états de différenciation altérés et à l’instabilité génomique observés dans divers contextes de recherche sur le cancer et le neurodéveloppement.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO HP1β (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CBX1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CBX1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CBX1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine HP1β.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CBX1 pour l'étude de la signalisation de HP1β, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CBX1 essentiels à la fonction de HP1β
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CBX1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le HP1β plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le HP1β plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CBX1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le HP1β plasmide HDR (h) et le HP1β (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CBX1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CBX1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.