HoxC5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406548
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- HoxC5 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico HoxC5, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HoxC5 Anticuerpo (1E10): sc-517171
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
HoxC5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406548 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
HOXC5 codifica el factor de transcripción HoxC5, una proteína homeobox de unión al ADN que contribuye al patrón anteroposterior y a la identidad regional durante el desarrollo embrionario. En tejidos diferenciados, HoxC5 puede influir en programas de especificación del destino celular, morfogénesis y migración al regular redes transcripcionales que interactúan con la organización de la cromatina y con vías de señalización del desarrollo. Se han descrito patrones de expresión desregulada de genes HOX, incluido HOXC5, en múltiples tipos de tumores y con frecuencia se asocian con estados de diferenciación alterados, mayor invasividad y reconfiguración transcripcional. Como regulador del desarrollo, HOXC5 también es relevante para estudiar el compromiso de linaje, la plasticidad epitelio-mesenquimal y los circuitos de regulación génica dependientes del contexto.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO HoxC5 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen HOXC5 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del HOXC5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de HOXC5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HoxC5.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en HOXC5 para la investigación de la señalización de HoxC5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de HOXC5 críticos para la función de HoxC5
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de HOXC5 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido HoxC5 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido HoxC5 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus HOXC5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HoxC5 (h) y el plásmido HDR HoxC5 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología HOXC5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana HOXC5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.