HoxC10 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431637

Descripción general

Hoxc10 codifica el factor de transcripción homeobox HOXC10, un regulador de unión al ADN específico de secuencia que ayuda a establecer el patrón anteroposterior y la identidad posicional durante la embriogénesis. En el desarrollo del ratón, los programas HOX se integran con redes de señalización impulsadas por morfógenos como las vías WNT, FGF, ácido retinoico y BMP para coordinar la especificación de linajes, la formación del esqueleto axial y la diferenciación regional. Más allá del desarrollo, la regulación alterada de los genes HOX se asocia con frecuencia a redes transcripcionales desreguladas que influyen en el mantenimiento del destino celular, la migración y la diferenciación. Por ello, la perturbación de programas asociados a HOXC10 es relevante para estudiar defectos congénitos de patrón y mecanismos de reprogramación transcripcional implicados en la biología de las enfermedades.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO HoxC10 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Hoxc10 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Hoxc10 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Hoxc10 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HoxC10.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Hoxc10 para la investigación de la señalización de HoxC10, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Hoxc10 críticos para la función de HoxC10
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Hoxc10 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido HoxC10 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido HoxC10 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Hoxc10. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HoxC10 (m) y el plásmido HDR HoxC10 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Hoxc10 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Hoxc10 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.