Plásmido Doble Nickase (h) HoxB3: sc-405460-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)HoxB3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HoxB3 (h) y el plásmido de doble nickasa HoxB3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HOXB3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) HoxB3 | sc-405460-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) HoxB3 | sc-405460-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXB3 codifica el factor de transcripción con homeobox HoxB3, un regulador de unión al ADN específico de secuencia que ayuda a establecer el patrón anteroposterior y la identidad segmentaria durante el desarrollo embrionario. En células humanas, HoxB3 modula programas transcripcionales vinculados a la especificación de linaje, la diferenciación y las redes de señalización impulsadas por morfógenos que coordinan el estado de la cromatina y la expresión génica del desarrollo. La expresión desregulada de HOXB3 se ha asociado con estados de diferenciación alterados y circuitería transcripcional oncogénica en varios contextos tumorales, lo que lo convierte en un nodo útil para estudiar la reprogramación del desarrollo. La investigación experimental de HOXB3 respalda estudios sobre redes de regulación génica, control epigenético del destino celular y funciones de factores de transcripción dependientes del contexto.
HoxB3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HOXB3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HOXB3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HOXB3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HOXB3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.