HoxA10 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420900

Descripción general

Hoxa10 codifica el factor de transcripción con homeobox HoxA10, un regulador de unión al ADN que pauta el eje embrionario anteroposterior y especifica la identidad regional en el desarrollo de los tractos urogenital y reproductor. En el ratón, HoxA10 contribuye a las redes reguladoras génicas del desarrollo al coordinar programas transcripcionales que controlan la determinación del destino celular, la diferenciación y la morfogénesis, con efectos dependientes del contexto sobre la proliferación y la remodelación tisular. Su actividad se integra con cofactores HOX/TALE más amplios y con la regulación de la cromatina para establecer estados transcripcionales específicos de cada segmento. La expresión desregulada de HOXA10 se ha asociado con alteraciones en la diferenciación hematopoyética y con programas transcripcionales leucemogénicos, lo que respalda su uso como nodo mecanístico en modelos de trastornos del desarrollo y de especificación de linajes relevante para el cáncer.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO HoxA10 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Hoxa10 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Hoxa10 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Hoxa10 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HoxA10.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Hoxa10 para la investigación de la señalización de HoxA10, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Hoxa10 críticos para la función de HoxA10
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Hoxa10 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido HoxA10 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido HoxA10 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Hoxa10. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HoxA10 (m) y el plásmido HDR HoxA10 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Hoxa10 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Hoxa10 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.