Hox11 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423423
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Hox11 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Hox11, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Hox11 Anticuerpo (1D7): sc-12760
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Hox11 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423423 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Tlx1 (Hox11) es un factor de transcripción con homeobox de la clase TALE que regula el patrón embrionario y la organogénesis, con funciones destacadas en el desarrollo del bazo y en la especificación de linajes hematopoyéticos en el ratón. Al unirse a elementos reguladores específicos de secuencia y asociarse con cofactores como las proteínas PBX/MEIS, Hox11 modula programas transcripcionales que controlan la proliferación y la diferenciación de progenitores, así como la compartimentalización de los tejidos. La actividad desregulada de TLX1/Hox11 se asocia con programas de desarrollo aberrantes y se ha implicado en redes transcripcionales oncogénicas, en particular en modelos de leucemogénesis de linaje T. En sistemas experimentales, Tlx1 ofrece un punto de entrada manejable para diseccionar el control transcripcional de redes génicas del desarrollo y su reconfiguración durante la transformación.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Hox11 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tlx1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tlx1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tlx1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Hox11.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tlx1 para la investigación de la señalización de Hox11, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Tlx1 críticos para la función de Hox11
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tlx1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Hox11 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Hox11 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tlx1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Hox11 (m) y el plásmido HDR Hox11 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tlx1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tlx1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.