Plásmido Doble Nickase (h) hnRNP C1/C2: sc-400993-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)hnRNP C1/C2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa hnRNP C1/C2 (h) y el plásmido de doble nickasa hnRNP C1/C2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HNRNPC. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: hnRNP C1/C2 Anticuerpo (4F4): sc-32308
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) hnRNP C1/C2 | sc-400993-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) hnRNP C1/C2 | sc-400993-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HNRNPC codifica la ribonucleoproteína nuclear heterogénea C1/C2 (hnRNP C1/C2), unas proteínas nucleares abundantes de unión a ARN que se ensamblan sobre el pre-ARNm naciente para regular la selección de sitios de empalme, la maduración del ARNm y la estabilidad de los transcritos. hnRNP C1/C2 ayuda a garantizar la fidelidad del procesamiento del ARN al competir con U2AF2 en tramos polipirimidínicos crípticos, limitando así la exonización aberrante de secuencias derivadas de Alu y moldeando el repertorio de isoformas. A través de estas actividades influye en programas más amplios de expresión génica vinculados al control del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y la proteostasis, y se estudia con frecuencia en el contexto de la desregulación del ARN observada en modelos de cáncer y enfermedades neurodegenerativas. La alteración de la expresión o la función de HNRNPC también se ha asociado con cambios en la señalización de la inmunidad innata y en redes transcripcionales adaptativas al estrés impulsadas por un metabolismo del ARN alterado.
hnRNP C1/C2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HNRNPC en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HNRNPC. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HNRNPC. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HNRNPC alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.