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hnRNP A1双切口酶质粒(m) | sc-420895-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
hnRNP A1双切口酶质粒(m2) | sc-420895-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Hnrnpa1 编码异质性核糖核蛋白 A1(hnRNP A1),这是一种在多种组织中广泛表达的 RNA 结合蛋白。它通过与剪接体组分和核糖核蛋白颗粒的动态相互作用,将 pre-mRNA 剪接、mRNA 输出与翻译过程耦联起来。hnRNP A1 调控可变外显子选择以及 RNA 代谢相关程序,从而影响细胞周期进程、应激反应并维持 RNA 稳态。其活性与核质转运和应激颗粒装配相关,将 RNA 加工与细胞应激及分化过程中被激活的通路连接起来。hnRNP A1 介导的剪接与 RNA 结合的失调已与神经退行性变及癌症相关的转录重编程有关,因此它是研究 RNA 加工缺陷机制的一个有用节点。
hnRNP A1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Hnrnpa1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Hnrnpa1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Hnrnpa1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Hnrnpa1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。