hnRNP A/B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420896

Descripción general

Hnrnpab codifica la ribonucleoproteína nuclear heterogénea A/B (hnRNP A/B) de ratón, una proteína de unión a ARN que se asocia con transcritos nacientes para regular el empalme del pre-ARNm, la selección alternativa de exones, la estabilidad del ARNm y el transporte núcleo-citoplasmático. hnRNP A/B participa en la regulación génica co- y posranscripcional dentro de complejos ribonucleoproteicos y ayuda a coordinar la dinámica del transcriptoma durante la proliferación y la diferenciación celular. A través de sus funciones en el procesamiento de ARN y el control posranscripcional, la alteración de la función de hnRNP A/B puede influir en vías vinculadas a respuestas al estrés, el mantenimiento del genoma y la proteostasis. La actividad desregulada de la familia hnRNP se ha asociado con un metabolismo del ARN alterado en cáncer y neurodegeneración, lo que convierte a Hnrnpab en un objetivo útil para estudios mecanísticos en modelos relevantes para enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO hnRNP A/B (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Hnrnpab en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Hnrnpab junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Hnrnpab tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína hnRNP A/B.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Hnrnpab para la investigación de la señalización de hnRNP A/B, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Hnrnpab críticos para la función de hnRNP A/B
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Hnrnpab para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido hnRNP A/B CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido hnRNP A/B CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Hnrnpab. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR hnRNP A/B (m) y el plásmido HDR hnRNP A/B (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Hnrnpab para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Hnrnpab definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.