Hmx3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420887

Descripción general

Hmx3 (proteína homeobox Hmx3) es un factor de transcripción que regula programas de expresión génica del desarrollo mediante la unión al ADN específica de secuencia y el control de decisiones sobre el destino celular. En el ratón, la actividad de Hmx3 está estrechamente vinculada a la morfogénesis del oído interno y al establecimiento de patrones neurodesarrollativos, coordinando redes transcripcionales downstream que moldean las estructuras sensoriales y la diferenciación neuronal. La alteración de circuitos reguladores impulsados por homeobox en los que participa Hmx3 puede modificar el patrón embrionario y la organogénesis, lo que lo hace relevante para estudiar fenotipos congénitos del desarrollo y la lógica reguladora de genes en la formación de los sistemas sensoriales. Como regulador nuclear, Hmx3 se investiga con frecuencia en el contexto del control transcripcional, la especificación de linajes y la comunicación cruzada entre vías de señalización del desarrollo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Hmx3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Hmx3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Hmx3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Hmx3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Hmx3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Hmx3 para la investigación de la señalización de Hmx3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Hmx3 críticos para la función de Hmx3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Hmx3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Hmx3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Hmx3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Hmx3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Hmx3 (m) y el plásmido HDR Hmx3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Hmx3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Hmx3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.