HKDC1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432046

Descripción general

Hkdc1 codifica HKDC1, una proteína que contiene un dominio de hexoquinasa e implicada en la fosforilación de la glucosa y en la regulación del uso celular de la glucosa. HKDC1 se asocia con el metabolismo central del carbono, contribuyendo al flujo glucolítico y a la coordinación de la homeostasis energética con la función mitocondrial y la detección de nutrientes. En sistemas murinos, la alteración de la actividad de Hkdc1 se ha relacionado con fenotipos metabólicos que afectan el manejo de la glucosa y las vías sensibles a la insulina, lo que la hace relevante para estudios de desregulación metabólica y respuestas al estrés en el hígado y otros tejidos con alta demanda energética. Su expresión y su acoplamiento funcional al metabolismo de los carbohidratos respaldan la investigación sobre cómo las enzimas tipo hexoquinasa moldean la adaptación celular a la disponibilidad de nutrientes.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO HKDC1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Hkdc1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Hkdc1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Hkdc1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HKDC1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Hkdc1 para la investigación de la señalización de HKDC1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Hkdc1 críticos para la función de HKDC1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Hkdc1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido HKDC1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido HKDC1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Hkdc1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HKDC1 (m) y el plásmido HDR HKDC1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Hkdc1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Hkdc1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.