Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (h) Histone H1X: sc-411232-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Histone H1X consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Histone H1X (h) y el plásmido de doble nickasa Histone H1X (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a H1FX. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Histone H1X Anticuerpo (E-5): sc-514856
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Histone H1X | sc-411232-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Histone H1X | sc-411232-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
H1FX codifica la histona H1X, una variante de histona enlazadora que se une al ADN nucleosómico y contribuye a la compactación de la cromatina de orden superior y a la organización del genoma. Al modular el espaciado de los nucleosomas y la accesibilidad de la cromatina, H1X influye en la regulación transcripcional, el momento de la replicación del ADN y las respuestas al daño del ADN dentro de las vías de control epigenético. La abundancia alterada o la redistribución de las proteínas de la familia H1 puede remodelar estados de la cromatina que afectan los programas de identidad celular y la expresión génica adaptativa al estrés. En consecuencia, H1FX se estudia con frecuencia en el contexto de la desregulación de la cromatina relevante para la biología del cáncer, los procesos del desarrollo y los fenotipos de estabilidad genómica.
Histone H1X El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus H1FX en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de H1FX. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de H1FX. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con H1FX alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.