Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) Histone H1: sc-404845-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Histone H1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Histone H1 (h) y el plásmido de doble nickasa Histone H1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HIST1H1B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Histone H1 Anticuerpo (H-2): sc-393358
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Histone H1 | sc-404845-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Histone H1 | sc-404845-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HIST1H1B codifica la histona enlazadora canónica H1.5 (Histona H1), una proteína clave de la arquitectura de la cromatina que se une al ADN nucleosomal y promueve la compactación de la cromatina a niveles superiores. Al regular el espaciado de los nucleosomas y la accesibilidad local, la Histona H1 influye en programas transcripcionales a escala genómica, en el momento de replicación del ADN y en la señalización del daño en el ADN dentro de vías asociadas a la cromatina. Las alteraciones en la estequiometría de H1 o en la dinámica de unión a la cromatina se han implicado en la desregulación epigenética observada en diversos cánceres y trastornos del desarrollo, lo que convierte a HIST1H1B en un locus útil para estudiar el control del estado de la cromatina y la estabilidad del genoma.
Histone H1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HIST1H1B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HIST1H1B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HIST1H1B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HIST1H1B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.