Histone Deacetylase 8 (HDAC8) Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400757-NIC

HDAC8 codifica a histona desacetilase 8, uma desacetilase de classe I dependente de Zn2+ que remove grupos acetil de resíduos de lisina em histonas e outras proteínas nucleares para modular a acessibilidade da cromatina e o output transcricional. Por meio da regulação da dinâmica de acetilação, a HDAC8 contribui para o controle epigenético da progressão do ciclo celular, de programas de diferenciação e da expressão gênica responsiva a danos no DNA. A atividade da HDAC8 intersecta-se com redes de remodelamento de cromatina e de repressão/ativação transcricional que coordenam vias de desenvolvimento e de resposta ao estresse. A expressão ou a função desreguladas de HDAC8 têm sido associadas a estados epigenéticos alterados observados em múltiplos contextos relevantes para doenças, sustentando seu uso como alvo em estudos mecanísticos de regulação gênica.

Histone Deacetylase 8 (HDAC8) O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HDAC8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HDAC8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HDAC8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HDAC8 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.