Plásmido Doble Nickase (h) Histone Deacetylase 7 (HDAC7): sc-400989-NIC

HDAC7 codifica la histona desacetilasa 7, una HDAC de clase IIa que se desplaza entre el núcleo y el citoplasma para regular la accesibilidad de la cromatina y los programas de transcripción de manera dependiente de señales. HDAC7 actúa en complejos correpresores e integra la señalización de quinasas dependientes de calcio/calmodulina para modular la expresión génica vinculada a la diferenciación celular, la supervivencia y la biología inmunitaria y endotelial. Al controlar los estados de acetilación en regiones reguladoras, HDAC7 influye en vías que gobiernan el compromiso de linaje y las respuestas inflamatorias, incluidas redes de transcripción asociadas a MEF2. La actividad y la expresión desreguladas de HDAC7 se han asociado con una regulación epigenética aberrante observada en el cáncer, así como en la patobiología cardiovascular e inmunitaria, lo que respalda estudios mecanísticos del control génico dependiente de la cromatina.

Histone Deacetylase 7 (HDAC7) El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HDAC7 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HDAC7. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HDAC7. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HDAC7 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.