Plásmido Doble Nickase (m) Histone Deacetylase 3 (HDAC3): sc-420818-NIC

Hdac3 codifica la desacetilasa de histonas 3 (HDAC3), una desacetilasa de histonas de clase I que actúa como núcleo catalítico de los complejos correpresores NCoR/SMRT y regula la accesibilidad de la cromatina mediante la desacetilación de lisinas. En células de ratón, HDAC3 coordina programas de represión transcripcional vinculados al control del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y la homeostasis metabólica, integrando señales de receptores nucleares y de vías inflamatorias. Al remodelar estados epigenéticos, HDAC3 influye en el compromiso de linaje y en la expresión génica específica de tejido, y su alteración se asocia con proliferación desregulada y fenotipos inmunitarios y metabólicos modificados. Estas funciones convierten a Hdac3 en un objetivo ampliamente utilizado para estudiar mecanismos dependientes de la cromatina que subyacen a programas transcripcionales relevantes para el cáncer, la inflamación y la biología de las enfermedades metabólicas.

Histone Deacetylase 3 (HDAC3) El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Hdac3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Hdac3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Hdac3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Hdac3 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.