Plásmido Doble Nickase (h) Histone cluster 1 H1E: sc-402775-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Histone cluster 1 H1E consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Histone cluster 1 H1E (h) y el plásmido de doble nickasa Histone cluster 1 H1E (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HIST1H1E. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Histone cluster 1 H1E | sc-402775-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Histone cluster 1 H1E | sc-402775-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HIST1H1E codifica la histona del clúster 1 H1E, una variante de la histona enlazadora H1 que se une al ADN nucleosomal y estabiliza la estructura de la cromatina de orden superior. Al modular el espaciado de los nucleosomas y la compactación de la cromatina, H1E influye en la accesibilidad del genoma para la transcripción, la replicación y la reparación del ADN, contribuyendo a la regulación epigenética y a la dinámica de la cromatina acoplada al ciclo celular. Las alteraciones en la composición o la dosis de histonas H1 pueden perturbar programas globales de expresión génica y la integridad de la cromatina, lo que convierte a HIST1H1E en una diana relevante en estudios sobre regulación del desarrollo, estabilidad genómica y remodelación de la cromatina asociada a enfermedades. Dado que las variantes de H1 pueden afectar redes transcripcionales específicas de linaje, HIST1H1E se examina con frecuencia en contextos como la diferenciación, las respuestas al estrés y la desregulación transcripcional.
Histone cluster 1 H1E El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HIST1H1E en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HIST1H1E. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HIST1H1E. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HIST1H1E alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.