Histamine H4 Receptor Plasmide Double Nickase (m): sc-432522-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Histamine H4 Receptor Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Histamine H4 Receptor Double Nickase Plasmid (m) e il Histamine H4 Receptor Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Hrh4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Histamine H4 Receptor Plasmide Double Nickase (m) | sc-432522-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Hrh4** codifica il recettore dell’istamina H4 (HRH4), un recettore accoppiato a proteine G prevalentemente associato alla segnalazione **Gi/o**, che modula i livelli di **cAMP** e le vie a valle legate a **MAPK/ERK** e **PI3K**. HRH4 è espresso in molteplici popolazioni di cellule immunitarie, dove influenza la chemiotassi, il rilascio di citochine e il traffico leucocitario, integrando i segnali istaminergici con i microambienti infiammatori. Attraverso questi processi, HRH4 è stato studiato in modelli di infiammazione allergica, prurito, risposte delle vie aeree di tipo asmatico e più ampie disregolazioni immunitarie. L’analisi della funzione di **Hrh4** aiuta a chiarire come la segnalazione dei recettori dell’istamina plasmi in vivo i comportamenti dell’immunità innata e adattativa.
Histamine H4 Receptor Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Hrh4 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Hrh4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Hrh4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Hrh4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.