Histamine H4 Receptor Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402430

Descripción general

HRH4 codifica el receptor de histamina H4 (H4R), un GPCR acoplado a Gi/o que se expresa predominantemente en compartimentos hematopoyéticos y de células inmunitarias, donde detecta la histamina para regular la quimiotaxis, la liberación de citocinas y la señalización dependiente de calcio. La activación del receptor suprime la actividad de la adenilil ciclasa, modula los niveles de AMPc y se integra con redes de señalización asociadas a MAPK y PI3K que determinan la migración de leucocitos y el tono inflamatorio. La actividad de HRH4 contribuye al tráfico de células inmunitarias y a la inflamación asociada a barreras, vinculando la señalización histaminérgica con procesos alérgicos e inflamatorios. La señalización desregulada de H4R se ha estudiado en contextos como asma, dermatitis, prurito y patologías inmunomediadas más amplias, donde con frecuencia se evalúan cambios dependientes del receptor en las respuestas a quimiocinas y en el reclutamiento de leucocitos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Histamine H4 Receptor (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen HRH4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del HRH4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de HRH4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Histamine H4 Receptor.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en HRH4 para la investigación de la señalización de Histamine H4 Receptor, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de HRH4 críticos para la función de Histamine H4 Receptor
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de HRH4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Histamine H4 Receptor CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Histamine H4 Receptor CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus HRH4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Histamine H4 Receptor (h) y el plásmido HDR Histamine H4 Receptor (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología HRH4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana HRH4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.