Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HiNF-P Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-416760
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- HiNF-P El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico HiNF-P, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HiNF-P Anticuerpo (C-5): sc-373855
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
HiNF-P Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-416760 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
HINFP codifica el factor de transcripción HiNF-P, un regulador de la expresión del gen de la histona H4 controlado por el ciclo celular, que ayuda a coordinar el ensamblaje de la cromatina con la replicación del ADN. HiNF-P actúa en promotores génicos activos en fase S y se integra con programas de control transcripcional y epigenético que mantienen la estabilidad del genoma durante la proliferación. La alteración del suministro de histonas dependiente de HINFP puede perturbar el depósito de nucleosomas, la temporización de la replicación y las respuestas al daño del ADN, vinculando esta vía con fenotipos de crecimiento desregulado estudiados en biología del cáncer y otros trastornos asociados a la proliferación. Como factor nuclear humano, HiNF-P se investiga con frecuencia en modelos de control del ciclo celular, estrés replicativo y organización de la cromatina.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO HiNF-P (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen HINFP en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del HINFP junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de HINFP tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HiNF-P.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en HINFP para la investigación de la señalización de HiNF-P, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de HINFP críticos para la función de HiNF-P
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de HINFP para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido HiNF-P CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido HiNF-P CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus HINFP. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HiNF-P (h) y el plásmido HDR HiNF-P (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología HINFP para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana HINFP definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.