Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HES2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407494
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- HES2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico HES2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HES2 Anticuerpo (H-8): sc-514711
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
HES2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407494 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
HES2 codifica un represor transcripcional básico de tipo hélice‑bucle‑hélice (bHLH) de la familia Hairy/Enhancer-of-split, que modula programas de expresión génica que controlan las decisiones de destino celular. Como efector downstream de la señalización de Notch, HES2 contribuye a redes de retroalimentación transcripcional que limitan la diferenciación y ayudan a coordinar los tiempos del desarrollo, a menudo mediante represión unida al promotor e interacción con complejos correpresores. Al influir en el compromiso de linaje y en el equilibrio entre proliferación y diferenciación, la actividad alterada de HES2 es relevante para el estudio de trastornos del desarrollo y de la desregulación asociada al cáncer de los circuitos transcripcionales dependientes de Notch. In vitro, la alteración de HES2 se utiliza comúnmente para investigar el control transcripcional del mantenimiento de progenitores, los programas neurogénicos y los resultados de diferenciación específicos del contexto.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO HES2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen HES2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del HES2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de HES2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HES2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en HES2 para la investigación de la señalización de HES2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de HES2 críticos para la función de HES2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de HES2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido HES2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido HES2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus HES2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HES2 (h) y el plásmido HDR HES2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología HES2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana HES2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.