Plásmido Doble Nickase (h) Hepatic Lipase: sc-403928-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Hepatic Lipase consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Hepatic Lipase (h) y el plásmido de doble nickasa Hepatic Lipase (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a LIPC. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Hepatic Lipase Anticuerpo (XHL3-6): sc-21740
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Hepatic Lipase | sc-403928-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Hepatic Lipase | sc-403928-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **LIPC** codifica la **lipasa hepática**, una lipasa de triglicéridos unida al endotelio que hidroliza triglicéridos y fosfolípidos en las lipoproteínas circulantes, influyendo en la remodelación de las HDL y en la conversión de IDL a LDL. Al regular la composición y el aclaramiento de las lipoproteínas, la lipasa hepática integra el transporte de lípidos con las vías de captación hepática y contribuye a la homeostasis energética sistémica. Las alteraciones en la actividad o la expresión de **LIPC** se han asociado con fenotipos de dislipidemia, incluidos cambios en los niveles de colesterol HDL y en la distribución de partículas lipídicas, lo que la convierte en una diana útil para estudios mecanísticos del metabolismo lipídico. **LIPC** también se estudia en el contexto de vías de riesgo cardiometabólico y de efectos gen‑ambiente sobre los perfiles lipídicos plasmáticos.
Hepatic Lipase El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus LIPC en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de LIPC. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de LIPC. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con LIPC alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.