Heme Oxygenase 2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420883

Descripción general

Hmox2 codifica la hemo oxigenasa 2 (HO-2), una enzima asociada al retículo endoplásmico y expresada de forma constitutiva que cataliza la degradación del hemo a biliverdina, hierro libre y monóxido de carbono. Mediante la regulación de la disponibilidad celular de hemo y la generación de metabolitos redox-activos, la HO-2 influye en las respuestas al estrés oxidativo, la homeostasis del hierro y la señalización mediada por monóxido de carbono, que puede modular el tono vascular y la actividad neuronal. En tejidos de ratón, Hmox2 destaca en el sistema nervioso y contribuye a la adaptación metabólica, la protección frente a la citotoxicidad mediada por hemo y la comunicación cruzada de la señalización inflamatoria. La alteración del recambio del hemo y los cambios en la actividad de HO-2 se han implicado en modelos de neuroinflamación, estrés isquémico y fisiología cardiopulmonar, lo que convierte a Hmox2 en un objetivo útil para estudios a nivel de vías sobre el metabolismo del hemo y la señalización del estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Heme Oxygenase 2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Hmox2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Hmox2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Hmox2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Heme Oxygenase 2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Hmox2 para la investigación de la señalización de Heme Oxygenase 2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Hmox2 críticos para la función de Heme Oxygenase 2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Hmox2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Heme Oxygenase 2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Heme Oxygenase 2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Hmox2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Heme Oxygenase 2 (m) y el plásmido HDR Heme Oxygenase 2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Hmox2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Hmox2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.