Heme Oxygenase 2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-420883

Übersicht

Hmox2 kodiert Hämoxygenase 2 (HO-2), ein konstitutiv exprimiertes, mit dem endoplasmatischen Retikulum assoziiertes Enzym, das den Abbau von Häm zu Biliverdin, freiem Eisen und Kohlenmonoxid katalysiert. Durch die Regulation der zellulären Hämverfügbarkeit und die Bildung redoxaktiver Metaboliten beeinflusst HO-2 die Reaktionen auf oxidativen Stress, die Eisenhomöostase sowie die kohlenmonoxidvermittelte Signalübertragung, die den Gefäßtonus und die neuronale Aktivität modulieren kann. In Mausgeweben ist Hmox2 besonders im Nervensystem ausgeprägt und trägt zur metabolischen Anpassung, zum Schutz vor hämvermittelter Zytotoxizität und zum Crosstalk inflammatorischer Signalwege bei. Eine fehlregulierte Hämbilanz und veränderte HO-2-Aktivität wurden in Modellen für Neuroinflammation, ischämischen Stress und die kardiopulmonale Physiologie in Zusammenhang gebracht, was Hmox2 zu einem nützlichen Ziel für pathway-orientierte Studien des Hämstoffwechsels und der Stresssignalgebung macht.

Das Heme Oxygenase 2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Hmox2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Hmox2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Hmox2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Heme Oxygenase 2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Hmox2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Heme Oxygenase 2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Hmox2-Exone abzielen, die für die Heme Oxygenase 2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Hmox2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Heme Oxygenase 2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Heme Oxygenase 2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Hmox2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Heme Oxygenase 2 HDR-Plasmid (m) und Heme Oxygenase 2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Hmox2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Hmox2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.