Partículas Lentivirales de Activación (h) Heme Oxygenase 1/HMOX1: sc-400157-LAC

HMOX1 codifica la hemo oxigenasa 1 (HO-1), una enzima inducible y sensible al estrés que cataliza la degradación del hemo a biliverdina (que posteriormente se convierte en bilirrubina), hierro ferroso y monóxido de carbono. Al regular el hemo intracelular y el equilibrio redox, HO-1 influye en las respuestas al estrés oxidativo, la homeostasis mitocondrial, el manejo del hierro y la señalización inflamatoria, y se induce comúnmente aguas abajo de NRF2/KEAP1 y otras vías activadas por el estrés. La alteración de la expresión de HMOX1 se estudia con frecuencia en contextos de disfunción vascular, neuroinflamación, estrés metabólico y remodelación del microambiente tumoral, donde sus productos enzimáticos pueden modular la señalización de citocinas, la autofagia y programas de supervivencia celular. Estas características hacen de HMOX1 un nodo central para investigar redes transcripcionales citoprotectoras y mecanismos de lesión impulsados por hemo/hierro en modelos celulares humanos.

Las partículas de activación lentiviral Heme Oxygenase 1/HMOX1 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de HMOX1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Heme Oxygenase 1/HMOX1 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción HMOX1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Heme Oxygenase 1/HMOX1. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo HMOX1 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.