HECTD1慢病毒激活颗粒(m): sc-431500-LAC
- 针对种属：mouse
- 200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
- HECTD1 慢病毒激活颗粒（m）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，通过细胞慢病毒转导，特异高效地上调目的基因的表达
- HECTD1慢病毒激活颗粒(m)包含以下SAM激活元素：一种是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，它融合了转录活化域VP64；一种是MS2-p65-HSF1融合蛋白；一种是目标特定的20 nt向导RNA。它们还含有杀稻瘟菌素，潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
- 一经转导，形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因，招募转录因子
- 由 HECTD1 慢病毒激活质粒 (m) 和 HECTD1 慢病毒激活质粒 (m2) 编码的 gRNA 靶向 Hectd1 启动子的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
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HECTD1慢病毒激活颗粒(m) | sc-431500-LAC | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Hectd1 基因编码 HECTD1，这是一种含 HECT 结构域的 E3 泛素连接酶，可催化泛素向蛋白底物的转移，从而调控其稳定性、细胞内定位及信号输出。研究表明，HECTD1 与细胞骨架组织和细胞极性的调控有关，影响细胞迁移、上皮形态发生以及发育过程中的组织模式形成等过程。通过对通路组分进行泛素依赖性的调节，HECTD1 常在蛋白质稳态网络以及控制分化与应激反应的信号级联背景下被研究。E3 连接酶活性与泛素信号的失调与先天缺陷、神经发育异常以及肿瘤相关表型普遍相关，因此 Hectd1 是小鼠体系中开展机制研究的一个重要节点。
HECTD1 慢病毒激活颗粒（m）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Hectd1 表达。
HECTD1 慢病毒激活颗粒（m）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在Hectd1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性HECTD1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 Hectd1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。